ГОСТ ISO 17372-2016

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА ДЛЯ ЖИВОТНЫХ

Определение содержания зеараленона методами иммуноаффинной колоночной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии

Animal feeding stuffs. Determination of zearalenone by immunoaffinity column chromatography and high performance liquid chromatography

МКС 65.120

Дата введения 2018-07-01

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Федеральным государственным бюджетным научным учреждением "Всероссийский научно-исследовательский институт кормов имени В.Р.Вильямса (ФГБНУ "ВНИИ кормов им.В.Р.Вильямса") на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (от 28 июня 2016 г. N 49)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 6 сентября 2016 г. N 1060-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 17372-2016 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2018 г.     

5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 17372:2008* "Корма для животных. Определение зеараленона иммуноаффинной колоночной хроматографией и высокоэффективной жидкостной хроматографией" ("Animal feeding stuffs - Determination of zearalenone by immunoaffinity column chromatography and high performance liquid chromatography", IDT), включая Изменение 1 (Amd 1:2013). Изменение к указанному международному стандарту, принятое после его официальной публикации, внесено в текст настоящего стандарта и выделено двойной вертикальной линией, расположенной на полях напротив соответствующего текста.

________________

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.

Международный стандарт разработан Техническим комитетом по стандартизации ISO/TC 34 "Пищевые продукты", подкомитетом SC 10 "Корма для животных" Международной организации по стандартизации (ISO).

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Май 2020 г.            

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

     1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод определения зеараленона в кормах для животных и в сырье для их производства, включая ячмень, кукурузу, овес, рожь, пшеницу, муку соевых бобов, муку из семян рапса, кукурузный глютен, сухую спиртовую барду, чечевицу и жом сахарной свеклы. Предел количественного определения зеараленона 0,05 мг/кг (50 мкг/кг). При проведении соответствующих испытаний лабораторией пользователя может быть достигнут более низкий предел количественного определения.

     2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированных - последнее издание (включая все изменения).

ISO 565, Test sieves - Metal wire cloth, perforated metal plate and electroformed sheet - Nominal sizes of openings (Сита контрольные. Проволочная ткань, перфорированные пластины и листы, изготовленные гальваническим методом. Номинальные размеры отверстий)

ISO 648, Laboratory glassware - single volume pipettes (Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной меткой)

ISO 1042, Laboratory glassware - One-mark volumetric flasks (Посуда лабораторная стеклянная. Мерные колбы с одной меткой)

ISO 3696, Water for analytical laboratory use - Specification and test methods (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний)

ISO 4788, Laboratory glassware - Graduated measuring cylinders (Посуда лабораторная стеклянная. Мерные градуированные цилиндры)

ISO 6498, Animal feeding stuffs - Preparation of test samples (Корма для животных. Приготовление проб для испытания)          

     3 Сущность метода

Анализируемую пробу экстрагируют ацетонитрилом, разбавленным водой, и фильтруют. Затем аликвоту фильтрата разбавляют водой или солевым фосфатным буфером (далее - ФБС) и очищают на иммуноаффинной колонке (далее - ИАК). Очищенные экстракты анализируют методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) с флуориметрическим детектированием. Присутствие зеараленона в пробе может быть подтверждено оценкой отношения величин эмиссии при возбуждении на двух длинах волн (236 и 274 нм), либо с использованием нормально-фазовой ВЭЖХ, либо применением диодно-матричного детектора.

     4 Реактивы

Используют реактивы только признанной аналитической чистоты, если не указано иначе.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Работы со всеми реактивами проводят в вытяжном шкафу. Используют защитные очки и защитную одежду, избегая контакта реактивов с кожей.

4.1 Вода 1-й степени чистоты по ISO 3696.

4.2 Ацетонитрил (CHCN) для ВЭЖХ.

4.3 Метанол (CHOH) для ВЭЖХ.

4.4 Хлористый натрий (NaCI) массовой долей основного вещества не менее 99%.

4.5 Экстрагирующий растворитель объемной долей ацетонитрила (CHCN)=90%.

Смешивают 900 см ацетонитрила (4.2) с 100 см воды (4.1). Тщательно перемешивают.

4.6 Разбавленный ацетонитрил объемной долей (CHCN)=50%.

Смешивают один объем ацетонитрила (4.2) с одним объемом воды (4.1). Хорошо перемешивают. Раствор используется в случае применения автосамплера.

4.7 Разбавленный метанол объемной долей (CHOH)=30%.

Смешивают 75 см метанола (4.3) с 175 см воды (4.1). Тщательно перемешивают.

4.8 Двузамещенный фосфорнокислый натрий (NaHPO) массовой долей основного вещества не менее 99%.

4.9 Однозамещенный фосфорнокислый калий (KHPO) массовой долей основного вещества не менее 99%.

4.10 Хлористый калий (KCI) массовой долей основного вещества не менее 99%.

4.11 Гидроксид натрия (NaOH) массовой долей основного вещества не менее 99%.

4.12 Солевой фосфатный буфер (ФСБ)

Растворяют в 1 дм воды (4.1) 8 г хлористого натрия (4.4), 1,16 г двузамещенного фосфорнокислого натрия (4.8), 0,2 г однозамещенного фосфорнокислого калия (4.9) и 0,2 г хлористого калия (4.10). Устанавливают значение рН 7,4 ед. рН с помощью раствора гидроксида натрия (4.13). Допускается использование готового концентрированного ФБС, разбавленного перед использованием.

4.13 Раствор гидроксида натрия, с (NaOH)=0,2 моль/дм

Растворяют 8 г гидроксида натрия (4.11) в 1 дм воды.

4.14 Подвижная фаза для ВЭЖХ

Помещают 460 см ацетонитрила (4.2) в колбу вместимостью 1 дм, добавляют 460 см воды (4.1) и 80 см метанола (4.3). Тщательно перемешивают и фильтруют через фильтр (5.13).

4.15 Основной стандартный раствор зеараленона с номинальным значением массовой концентрации 50 мкг/см

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Зеараленон - микотоксин, обладающий эстрогенным действием. При обращении с ним следует учитывать его биологическую активность.

Взвешивают 5,0 мг зеараленона с точностью ±0,1 мг. Помещают в мерную колбу вместимостью 100 см (5.1.2). Растворяют в ацетонитриле (4.2) и доводят раствор до метки этим же растворителем.

Фактическое значение массовой концентрации зеараленона в основном стандартном растворе определяют следующим образом.

Отбирают пипеткой (5.1.3) 4,0 см основного стандартного раствора зеараленона, переносят в мерную колбу вместимостью 25 см (5.1.2), доводят до метки ацетонитрилом (номинальное значение массовой концентрации зеараленона в полученном растворе 8 мкг/см).

Измеряют оптическую плотность в ультрафиолетовой (УФ) области при длине волны 274 нм, используя кварцевую кювету с длиной оптического пути 10 мм. Определяют концентрацию зеараленона (CHO), в мг/см, по формуле

(CHO)=,

где - относительная молекулярная масса зеараленона, равная 318,4 г/моль;

- оптическая плотность при 274 нм;

- молярный коэффициент поглощения зеараленона при 274 нм, равный (12623±111), моль·дм·см.